Caracterización lipidómica y proteómica

Responsable

Diego Gómez-Coronado

Personal

Dr. Óscar Pastor Rojo (Lipidómica)

Dr. Alberto Alcazar (Proteómica)

Dra. Emma Mártinez (Proteómica)

Dr. Diego Gómez-Coronado (Esteroles y lipoproteínas)

Contacto

  • Equipamiento
    • Espectrómetro de masas MALDI-TOF/TOF UltrafleXtreme.
    • Equipos de electroforesis mono- y bi-dimensionales; equipos de IEF Multiphor II y Processor PLus.
    • Equipos de cromatografía biocompatible FPLC y de alta resolución HPLC, con inyector automático refrigerado, módulo de detección DAD, fluorescencia, UV visible y electroquímico, colector de fracciones y termostatizador.
    • Sistema de LC-MS de alta resolución cuantitativa con fuentes ESI y APCI.
    • Sistema GC-MS de cromatografía de gases y espectrometría de masas.
    • Ultracentrífugas.
    • Contador de centelleo Tri-Carb 4910 TR.
  • Cartera de servicios

    PROTEÓMICA

    DESCRIPCIÓN

     

    Determinación de masas moleculares de fármacos, pequeña molécula, péptidos y proteínas

    Análisis por MS MALDI-TOF

     

    Identificación de proteínas

    Digestión + análisis MS + búsqueda en bases de datos. Análisis MS por huella peptídica o  MS/MS (MALDI-TOF/TOF)

     

    Cuantificación péptidos

    Análisis por MS MALDI-TOF, relación con estándar interno, informe cuantitativo

     

    Inmunoproteómica

    Identificación de proteínas por MS combinada con western blot 1D/2D

     

    Electroforesis 1D

    1D en SDS-PAGE minigel/gel

     

    Electroforesis 2D

    2D en SDS-PAGE minigel/gel (no incluye tinción y escaneo)

     

    Tinciones

    Coomassie, plata por minigel/gel

     

    Escaneo gel

    Escaneo en Odyssey o ChemiDoc

     

    Etiquetado

    Marcaje sonda fluorescente

     

    Proteómica diferencial

    2D-DIGE (incluye gel 2D, etiquetado y escaneo)

     

    Proteómica diferencial

    Análisis bioinformático de datos

     

    ESTEROLES Y LIPOPROTEÍNAS

    DESCRIPCIÓN

     

    Análisis de esteroles

    Análisis de esteroles (colesterol, desmosterol, 7-deshidrocolesterol, etc.) en plasma, tejidos o células. El estudio incluye la extracción de los lípidos saponificables y la separación de los esteroles mediante HPLC y cuantificación a partir de la absorbancia específica

     

    Biosíntesis de colesterol

    Biosíntesis de colesterol (incorporación de acetato radiactivo a los distintos esteroles de la ruta biosintética). El estudio incluye la incubación de las células en presencia del trazador, la extracción de los lípidos, la separación de los esteroles mediante HPLC y la cuantificación de su radiactividad.

     
     

    Se entrega un listado de la radiactividad en los distintos esteroles (DPM/mg proteína).

    Tiempo estimado de ejecución: 20 días

     

    Capacidad para estimular la exportación celular de colesterol (CEC)

    Determinación de la capacidad de muestras de plasma (total o sin LpB) para estimular la exportación de  3H-colesterol incorporado a células en cultivo.

     
     

    Se entrega un listado de grado de exportación de colesterol respecto a muestra control

    Tiempo estimado de ejecución: según número de muestras (mínimo 20 días)

     

    LIPIDÓMICA

    DESCRIPCIÓN

     

    Extracción base de lípidos (10 muestras)

    Extracción con solventes orgánicos para aislar los lípidos de la muestra

     

    Extracción esfingolípidos (10 muestras)

    Extracción ampliada de lípidos para extraer la clase esfingolípidos

     

    Lipidómica estándar  (CE, TG, PE, PC, DG, LPC, LPE, SM) (10 muestras)

    Análisis de especies moleculares pertenecientes a las clases: ésteres de colesterol (CE), trigliceridos (TG), diglicéridos (DG), fosfolipidos de colina (LPC, PC, SM), fosfolípiodos de etanolamina (LPE, PE).

     

    Lipidómica de esfingolípidos (SM, Cer, dhCer, HexCer, LacCer, Sulf)  (10 muestras)

    Análisis de especies moleculares de esfingolípido pertenecientes a las clases: esfingomielina (SM), Ceramidas (Cer, dhCer), hexosilceramidas (HexCer), Lactosilceramidas (LacCer), Sulfátidos (Sulf).

     

    Lipidómica de fosfolipidos ácidos (PI,PS,CL,PG,BMP) (10 muestras)

    Análisis de especies moleculares de esfingolípido pertenecientes a las clases: esfingomielina (SM), Ceramidas (Cer, dhCer), hexosilceramidas (HexCer), Lactosilceramidas (LacCer), Sulfátidos (Sulf).

     

    Lipidómica de fosfolipidos ácidos (PI,PS,CL,PG,BMP) (10 muestras)

    Análisis de especies moleculares de lípido de carácter ácido: fosfatidilinositol (PI), fosfatidilserina (PS), fosfadidilgliceroles (PG, BMP), cardiolipinas (CL).

     

    Análisis bioinformático (10 muestras)

    El analisis bioinformático incluye: procesamiento y filtrado de señales del masas, integración de picos, corrección de cantidad de muestra, corrección por estándar interno, emisión de informe cuantitativo, gráficos y análisis de componentes principales (PCA).

     

    **Consultar tarifas con la unidad